供應(yīng)商 | 上海篤瑪生物科技有限公司 店鋪 |
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認(rèn)證 | |
報(bào)價(jià) | 人民幣 2400.00元每盒 |
關(guān)鍵詞 | ELISA試劑盒,指標(biāo)ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,吸附測(cè)定法 |
所在地 | 上海市寶山區(qū)河曲路118號(hào)6981室 |
僅供研究使用
豚鼠鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA試劑盒
酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù),常用于醫(yī)學(xué)、生物領(lǐng)域中的抗原或檢測(cè)。其使用范圍包括:1.臨床診斷:ELISA可以用于檢測(cè)傳染?。ㄈ纭⒌龋?、標(biāo)志物等,協(xié)助進(jìn)行診斷。2.食品安全:ELISA可以用于檢測(cè)食品中的有害(如殘留、獸藥殘留等),保障食品安全。3.監(jiān)測(cè):ELISA可以用于評(píng)估水質(zhì)、空氣等指標(biāo),監(jiān)測(cè)狀況。4.生物分子檢測(cè):ELISA可以用于檢測(cè)生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域廣泛應(yīng)用??傊?,酶聯(lián)吸附法在醫(yī)學(xué)、生物領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,是臨床診斷和中重要的輔助手段。
酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù),常用于醫(yī)學(xué)、生物領(lǐng)域中的抗原或檢測(cè)。其操作步驟如下:1.包被:將抗原或與酶結(jié)合,形成酶標(biāo)抗原或,并固定在固相載體上。2.洗滌:去除未結(jié)合的和雜質(zhì)。3.封閉:加入封閉液,封閉固相載體上未結(jié)合的位點(diǎn),以非特結(jié)合。4.洗滌:去除未結(jié)合的封閉液和雜質(zhì)。5.加樣:加入待檢測(cè)的樣本,使其與固相載體上的抗原或結(jié)合。6.洗滌:去除未結(jié)合的樣本和雜質(zhì)。7.加入酶標(biāo):使固相載體上的抗原或與酶標(biāo)結(jié)合,將抗原或間接標(biāo)記上酶。8.洗滌:去除未結(jié)合的酶標(biāo)和雜質(zhì)。9.顯色:加入底物,使酶催化底物生成有色產(chǎn)物,根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行抗原或的定性或定量檢測(cè)。需要注意的是,具體的操作步驟可能因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)、試劑品牌等不同而有所差異。在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)手冊(cè)進(jìn)行操作,控制好實(shí)驗(yàn)條件和操作步驟,以實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
試劑盒操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。 為實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的品溶液。
2.棄去,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記加99μl生物素標(biāo)記稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi),甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi),甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)可見(jiàn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn))。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
豚鼠鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA試劑盒
ELISA試劑盒的操作步驟如下:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml,酶標(biāo)板中每孔加入50μl,室溫、4℃或37℃過(guò)夜包被。2.洗滌:棄包被液(拍干,再用無(wú)塵紙吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次(每孔均要加滿),每次3min~5min。3.封閉:每孔加封閉液(1%BSA)250μl,37℃封閉2h。4.洗滌:用1×PBST洗滌液洗板3次,每次3min~5min。5.結(jié)合一抗:用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢,每孔100μl,要設(shè)立陰性對(duì)照,37℃孵育1.5h。6.洗滌:同上。7.結(jié)合酶標(biāo)二抗:每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標(biāo)二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀釋倍數(shù)根據(jù)產(chǎn)品不同有所不同,可按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行)50μl,37℃孵育1h.8.洗滌:同上。9.顯色:每孔加底物溶液(TMB)50μl,置室溫避光顯色10min。10.待顯色后,每孔加入50μl終止液(2mol/L H2SO4)終止反應(yīng)。使用酶標(biāo)儀讀取450nm的OD值,以確定水平。以上步驟僅供參考,具體操作請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
標(biāo)本的采集及保存:
:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 (注:標(biāo)本溶血會(huì)影響**檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。)
標(biāo)本的稀釋原則:通過(guò)文獻(xiàn)檢索的了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。 如配制150 pg/ml品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
生物素標(biāo)記的稀釋原則:臨用前以生物素標(biāo)記稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記加990μl生物素標(biāo)記稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用小時(shí)內(nèi)配制。
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用小時(shí)內(nèi)配制
注意事項(xiàng):
1.當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2.洗滌非常重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。
3.一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,建議使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做曲線,做復(fù)孔。
5.如標(biāo)本中待測(cè)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以稀釋倍數(shù)。
6.在配制品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7.底物請(qǐng)避光保存。
8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
試劑盒性能
1.準(zhǔn)確性:品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2.靈敏度檢測(cè)濃度小于10 pg/ml。
3.特:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。
4.重復(fù)性:批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和15%。
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主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA檢測(cè)試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑
上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的生物企業(yè)。 總部位于上海,并在全國(guó)設(shè)有經(jīng)銷(xiāo)或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶(hù)為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠(chéng)信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及的倉(cāng)儲(chǔ)和物流系統(tǒng)。“篤瑪生物”已經(jīng)得到全國(guó)科研工作者的認(rèn)可,成為廣大經(jīng)銷(xiāo)商推崇的品牌。 公司擁有一批的研發(fā)人員,我們專(zhuān)注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣,品質(zhì)可靠。先后開(kāi)發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí),提供各種常規(guī)生化試劑,庫(kù)存常備產(chǎn)品多達(dá)10000多種,可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類(lèi)試劑。在質(zhì)量方面,謹(jǐn)記公司信念:質(zhì)量一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程,科學(xué)的質(zhì)量檢測(cè)方法和成熟的質(zhì)量檢測(cè)程序,我們恪守對(duì)每一位用戶(hù)的承諾:用的態(tài)度做的品牌。同時(shí),公司組建了一支的技術(shù)服務(wù)隊(duì)伍,能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咛峁┑募夹g(shù)服務(wù)。每一位購(gòu)買(mǎi)篤瑪生物產(chǎn)品的用戶(hù)都能夠得到的咨詢(xún)和完善的售后服務(wù)。
王不留行環(huán)肽B
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3,4,5-三咖啡??鼘幩?/p>
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決明子苷B2
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