吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)試劑盒可見分光光度法說明書
可見分光光度法 50管/24樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
產(chǎn)品名稱:吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)試劑盒可見分光光度法
貨號:LZ-S01114-A
規(guī)格 : 50管/24樣
測試方法:可見分光光度法
產(chǎn)品分類:氨基酸代謝系列
發(fā)貨地:上海
測定意義:
脯氨酸是植物體內(nèi)適應逆境脅迫的一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同,分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以谷氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關鍵酶,對植物適應逆境脅迫起關鍵作用。
測定原理:
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨酸生成P5C過程中分解ATP生成ADP和無機磷,通過鉬酸銨比色法測定單位時間內(nèi)產(chǎn)生無機磷的量可確定P5CS活性。
需自備的儀器和用品:
可見外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體 60 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 6 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體 6 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存,用時加入 25 mL 蒸餾水,溶解后 4℃保存一周;
試劑五:粉劑×1 瓶,4℃保存,用時加入 25 mL 蒸餾水,溶解后 4℃保存一周;
試劑六:液體 25mL×1 瓶,室溫保存;
試劑七:10mmol/L 標準磷貯備液 10mL×1 瓶,4℃保存。
NAD+和 NADH 的提?。?/span>
1 血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提取:按照血清(漿)體積(mL):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 酸性提取液),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提取:按照血清(漿)體積(mL):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 堿性提取液),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2 組織中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g組織,加入 1mL 酸性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g組織,加入 1mL 堿性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
3 細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入1mL 酸性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿性提取液體積(mL)500~1000:1的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 堿性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
操作步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
生化檢測試劑盒常見問題:
在使用生化檢測試劑盒時,可能會遇到一系列常見問題,這些問題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實驗操作等方面。以下是一些常見的問題及其解決方法:
一、?測定原理?:生化試劑盒通過化學反應或酶促反應測定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計和酶標儀,它們的測定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動植物組織、血清、細胞細菌、食品等樣本均可進行測定?。
?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?:根據(jù)實驗的實際情況選擇合適的試劑盒。如果實驗室有酶標儀且具備檢測波長,可以選擇微量法試劑盒;如果有分光光度計及相應規(guī)格的比色皿,則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購買前仔細閱讀說明書,確認自備的儀器和試劑是否符合要求?。
?三、保存方法?:收到試劑盒后,如果暫時不用,應按照外包裝上指示的溫度保存。拆開包裝后,應按照每個試劑的保存溫度進行保存,注意有些試劑忌反復凍融,有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。
四、?有效期?:一般生化試劑盒的有效期為6個月,也有特殊貨號的有效期為1年。具體以實際收到貨物的標簽信息為準?1。
?五、樣本處理?:新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標的測定,但有些生理活性物質(zhì)容易降解,建議使用新鮮樣本測定。對于冷凍樣本,建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時間有所不同,例如4℃可保存一周,-20℃保存一個月,-80℃保存3個月?。
?六、土壤酶活性測定?:對于土壤酶活性的測定,建議將鮮土風干并過篩后取樣,以測定的重復性。若使用鮮土測定,需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。
七、?預測定?:在進行正式測定前,建議選擇2-3個預期結(jié)果差別較大的樣本做預實驗。通過預測定可以全面反映樣品特點、試劑質(zhì)量、儀器設備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性,確保正式測定結(jié)果真實可靠?。
公司正在出售的產(chǎn)品:
CD4 CD4(抗原 0.5mgCD4 CD4(抗原)
EED Protein Human 重組人 EED / Embryonic Ectoderm Development 蛋白 (His & GST 標簽)
CD200重組小鼠 CD200 蛋白 (His 標簽) Protein
CD274 Protein Mouse 重組小鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His & Fc 標簽)
S100B重組人 S100B 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒 ,英文名: GR ELISA Kit
小鼠白介素6(IL-6)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin6,IL-6ELISAKIT 96T/48T
人骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒 Human Crosslaps,Cr ELISA Kit
RatFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit大鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ACD血液抗凝液100毫升
Mousegonadoopin-releasinghormone,GHELISA試劑盒小鼠促性腺激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CD200重組小鼠 CD200 蛋白 (His 標簽) Protein
CD4 CD4(抗原 0.5mgCD4 CD4(抗原)
S100B重組人 S100B 蛋白 (His 標簽) Protein
EED Protein Human 重組人 EED / Embryonic Ectoderm Development 蛋白 (His & GST 標簽)
CD274 Protein Mouse 重組小鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His & Fc 標簽)
吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)試劑盒可見分光光度法小鼠核心蛋白聚糖(DCN)ELISA試劑盒 ,英文名: DCN ELISA Kit
雞白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒ChickenIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T
人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)試劑盒 Human Collagen Type Ⅲ,Col Ⅲ ELISA KIT
英文名稱MousesubstancePreceptorELISAKit小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)規(guī)格:96T/48T
冰凍切片組織HISTONEH3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
RatcrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
輔酶ⅠNAD(H)含量試劑盒可見分光光度法
325元
產(chǎn)品名:輔酶ⅠNAD,(H)含量試劑盒,可見分光光度法
輔酶ⅠNAD(H)含量試劑盒微量法
598元
產(chǎn)品名:輔酶ⅠNAD,(H)含量試劑盒,微量法
陰溝腸桿菌分離瓊脂(ECIA)
3200元
產(chǎn)品名:陰溝腸桿菌分離瓊脂,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯生化管
3200元
產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯生化管,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯
3200元
產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯
3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆多粘菌素,培養(yǎng)基
胰酶細胞消化液(不含EDTA)
3200元
產(chǎn)品名:胰酶細胞消化液,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎
3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆羊血,培養(yǎng)基