海生菌瓊脂培養(yǎng)基
貨號(hào):LZ-PYJ5658
英文名稱:Marine Agar
產(chǎn)品規(guī)格:250g|2×250g
保存:RT
海生菌肉湯也稱Bacto Marine Broth 2216,海生菌瓊脂(Zobell Mariner Agar)也稱ZMA培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)海洋細(xì)菌的異養(yǎng)型培養(yǎng)。
成分組成:(g/L)
配制方法:
1.稱取適量蒸餾水,打開磁力攪拌器,分批緩慢加入培養(yǎng)基,溶解,定容后調(diào)節(jié)pH至7.6。
2.121℃高壓蒸汽滅菌15min(會(huì)有乳白色沉淀)。海生菌肉湯可以選擇過濾除菌。
注意:滅菌后,分裝或倒板前應(yīng)充分搖勻培養(yǎng)基,盡量讓沉淀分散均勻。
3.接種以下質(zhì)控菌株,放置20~25℃需氧培養(yǎng)40~72小時(shí)。
配制過程中的常見問題分析:
01 培養(yǎng)基顏色不正確
(1)含有酸堿指示劑的培養(yǎng)基,若顏色不正確,通常是由于pH不正確導(dǎo)致的,加熱過度、錯(cuò)誤的滅菌方式等都會(huì)導(dǎo)致此項(xiàng)問題。
(2)加熱過度導(dǎo)致某些成分分解或糖焦化,如SC培養(yǎng)基(SC增菌液)加熱過度會(huì)變紅,含糖量高的培養(yǎng)基,加熱過度通常會(huì)出現(xiàn)顏色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分變質(zhì),如血液久置易變黑,制成的平板顏色偏棕黑色。
02 培養(yǎng)基不凝固或凝固性差
(1)顆粒培養(yǎng)基稱量錯(cuò)誤
(2)瓊脂分布不均勻
(3)培養(yǎng)基pH不正確
(4)培養(yǎng)基加熱過度
(5)瓊脂量不足
03 培養(yǎng)基產(chǎn)生沉淀
(1)某些培養(yǎng)基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培養(yǎng)基等,配方中含有大量不溶性碳酸鈣。
(2)滅菌前未充分溶解,若滅菌前溶解不充足,滅菌后就會(huì)出現(xiàn)大量沉淀。
(3)pH不正確,偏酸或偏堿都有可能使培養(yǎng)基中的部分金屬離子產(chǎn)生沉淀。
(4)水的純度不夠,天然水中含有較多的礦物鹽離子,若未除凈,則易與培養(yǎng)基中反應(yīng)生成沉淀。
(5)添加劑加入溫度不正確,卵黃、血液等對(duì)溫度敏感的添加成分,若加入時(shí)溫度過高或溫差過大,易出現(xiàn)凝塊。
(6)稱量錯(cuò)誤。
(7)試劑加入順序不正確。
注意事項(xiàng):
1)培養(yǎng)基盡量使用新鮮培養(yǎng)基,2~4h內(nèi)用完;
2)上海應(yīng)使用預(yù)還原培養(yǎng)基,預(yù)還原24~48h更好;
3)可采用預(yù)還原滅菌法制作的培養(yǎng)基(用前于培養(yǎng)基中加入還原劑,如L-半胱氨酸、維生素C等,盡可能使預(yù)還原劑處于還原狀態(tài));
4)液體培養(yǎng)基應(yīng)煮沸10min,以驅(qū)除溶解氧,并迅速冷卻,立即接種醫(yī)。學(xué)教育網(wǎng)搜集整理;
5)厭氧菌的培養(yǎng)基均應(yīng)營養(yǎng)豐富,并加有還原劑與生長(zhǎng)刺激因子(血清、維生素K、氯化血紅素、聚山梨酯-80等)。
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